Përmbajtje:
Video: Si e gjeni përqendrimin e ADN-së nga absorbimi?
2024 Autor: Miles Stephen | [email protected]. E modifikuara e fundit: 2023-12-15 23:40
Përqendrimi i ADN-së vlerësohet duke matur absorbimi në 260 nm, duke rregulluar A260 matja e turbullirës (e matur me absorbimi në 320 nm), duke shumëzuar me faktorin e hollimit dhe duke përdorur marrëdhënien që një A260 prej 1.0 = 50 μg/ml dsDNA e pastër.
Po kështu, njerëzit pyesin, si e gjeni përqendrimin e ADN-së?
Për të përcaktuar përqendrimin e ADN-së në kampionin origjinal, kryeni llogaritjen e mëposhtme:
- Përqendrimi i dsADN-së = 50 μg/mL × OD260 × faktori i hollimit.
- Përqendrimi i dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
- Përqendrimi i dsADN-së = 1.63 mg/mL.
Gjithashtu, çfarë është një përqendrim i mirë i ADN-së? A mirë cilësisë ADN mostra duhet të ketë një A260/A280 raporti 1.7-2.0 dhe një A260/A230 raporti më i madh se 1.5, por meqenëse ndjeshmëria e teknikave të ndryshme ndaj këtyre ndotësve ndryshon, këto vlera duhet të merren vetëm si një udhëzues për pastërtinë e kampionit tuaj.
Në këtë mënyrë, a përthithet ADN-ja në 280 nm?
Raporti i absorbimit është 260 nm vs 280 nm është përdoret zakonisht për të vlerësuar ADN ndotja e tretësirave të proteinave, pasi proteinat (në veçanti, aminoacidet aromatike) thithin dritë në 280 nm.
Si e përdorni NanoDrop për përqendrimin e ADN-së?
Në thelb nanopika ju jep mundësinë për të zgjedhur ADN , ARN, Proteinat. Duhet të zgjidhni ADN , më pas vendosni 2 ΜL ujë (preferohet mili Q) zgjidhni "Blank" pas kësaj vendosni edhe 2 ΜL ujë për të konfirmuar që masa është 0. Më pas vendosni 2 ΜL të kampionit tuaj. Ju do të merrni matjen.
Recommended:
A mund të dalloni nga këto spektra absorbimi nëse drita e kuqe është efektive në nxitjen e fotosintezës?
Nuk mund të thuhet nga ky grafik, por për shkak se klorofili a thith dritën e kuqe, mund të parashikojmë se do të ishte efektiv në nxitjen e fotosintezës. Këto pigmente janë në gjendje të thithin më shumë gjatësi vale të dritës (dhe kështu më shumë energji) sesa klorofila a mund të thithë vetëm
Si e gjeni molaritetin nga absorbimi?
Ekuacioni duhet të jetë në formën y=mx + b. Pra, nëse zbritni prerjen tuaj y nga absorbimi dhe ndani me pjerrësinë, do të gjeni përqendrimin e kampionit tuaj
Pse ulet absorbimi në fotosintezë?
Drita blu: Vlerat e përthithjes do të ulen me kalimin e kohës pasi drita blu absorbon karotenoidet dhe klorofilin b për fotosintezë. Kështu DCPI do të zvogëlohet dhe do të ndryshojë nga blu në të pangjyrë me kalimin e kohës
Si e gjeni gjatësinë e valës nga absorbimi?
Shumëzoni l me c dhe më pas pjesëtoni A me produktin për të zgjidhur përthithjen molare. Për shembull: Duke përdorur një kuvetë me gjatësi 1 cm, keni matur përthithjen e një tretësire me përqendrim 0,05 mol/L. Absorbimi në një gjatësi vale prej 280 nm ishte 1.5
Si e gjeni konstanten e ekuilibrit nga absorbimi?
X = [Fe(SCN)2+] dhe duhet të përcaktohet nga kurba standarde. Më pas mund të llogarisni konstantën e ekuilibrit, Keq, duke përdorur përqendrimet e ekuilibrit. Kurba standarde është një grafik i Absorbimit kundrejt [Fe(SCN)2+] (Figura 8.1). Mund të përdoret për të na dhënë përqendrimin e një solucioni kur jepet përthithja