Video: Si llogaritet përqendrimi i ADN-së duke përdorur spektrofotometri?
2024 Autor: Miles Stephen | [email protected]. E modifikuara e fundit: 2023-12-15 23:40
Përqendrimi i ADN-së është vlerësuar nga duke matur përthithjen në 260 nm, duke rregulluar A260 matja e turbullirës ( matur nga absorbimi në 320 nm), duke u shumëzuar nga faktori i hollimit dhe duke përdorur marrëdhënia që një A260 prej 1.0 = 50 μg/ml dsDNA e pastër.
Njerëzit pyesin gjithashtu, si e gjeni përqendrimin dhe pastërtinë e ADN-së?
Për të vlerësuar Pastërtia e ADN-së , matni thithjen nga 230 nm në 320 nm për të zbuluar ndotës të tjerë të mundshëm. Më e zakonshme llogaritja e pastërtisë është raporti i përthithjes në 260 nm pjesëtuar me leximin në 280 nm. Cilësi të mirë ADN do të ketë një A260/A280 raporti 1.7–2.0.
Po kështu, çfarë është një përqendrim i mirë i ADN-së? A mirë cilësisë ADN mostra duhet të ketë një A260/A280 raporti 1.7-2.0 dhe një A260/A230 raporti më i madh se 1.5, por meqenëse ndjeshmëria e teknikave të ndryshme ndaj këtyre ndotësve ndryshon, këto vlera duhet të merren vetëm si një udhëzues për pastërtinë e kampionit tuaj.
Lidhur me këtë, si e llogarit NanoDrop përqendrimin e ADN-së?
Ju e shumëzoni vlerën e absorbimit në 260 nm me një faktor fiks (është 50 për ADN ) dhe ju merrni Përqendrimi i ADN-së . Voilá. (Ok, teknikisht është A260 i një kampioni 10 mm të trashë që shumëzohet me 50; NanoDrop shpreh A260 sikur mostra të ishte 10 mm e trashë, si në një kuvetë standarde).
Pse na u desh të përdorim një spektrofotometër për të përcaktuar sasinë e ADN-së tonë?
A spektrofotometri është në gjendje të përcaktojë përqendrimet mesatare të acideve nukleike ADN ose ARN e pranishme në një përzierje, si dhe pastërtia e tyre. Duke përdorur ligji Beer-Lambert është është e mundur të lidhet sasia e dritës së përthithur me përqendrimin e molekulës absorbuese.
Recommended:
Si të zgjidhni një ekuacion kuadratik duke përdorur ligjin e faktorit zero?
Nga kjo mund të konkludojmë se: Nëse prodhimi i çdo dy numrash është zero, atëherë një ose të dy numrat janë zero. Kjo do të thotë, nëse ab = 0, atëherë a = 0 ose b = 0 (që përfshin mundësinë që a = b = 0). Ky quhet Ligji i Faktorit Nul; dhe e përdorim shpesh për të zgjidhur ekuacionet kuadratike
Si e matni diametrin e një cilindri duke përdorur një kaliper vernier?
Për të gjetur gjatësinë e cilindrit/objektit: Mbajeni cilindrin nga skajet e tij duke përdorur nofullat e poshtme të kaliperit të vernierit. Vini re leximin në shkallën kryesore që shtrihet vetëm në të majtë të pikës zero të shkallës së vernierit. Tani kërkoni shenjën në shkallën e vernierit e cila përputhet me një shenjë në shkallën kryesore
Si i gjeni rrënjët imagjinare duke përdorur rregullin e shenjave të Dekartit?
Rregulli i shenjave të Dekartit thotë se numri i rrënjëve pozitive është i barabartë me ndryshimet në shenjën e f(x), ose është më i vogël se ai me një numër çift (kështu që ju vazhdoni të zbritni 2 derisa të merrni ose 1 ose 0). Prandaj, f(x) e mëparshme mund të ketë 2 ose 0 rrënjë pozitive. Rrënjët e vërteta negative
Si e përpunoni forcën rezultante duke përdorur një paralelogram forcash?
Për të gjetur rezultatin, do të bëni një paralelogram me anët e barabarta me dy forcat e aplikuara. Diagonalja e këtij paralelogrami atëherë do të jetë e barabartë me forcën rezultante. Ky quhet ligji i paralelogramit të forcave
Cili është ekuacioni i përdorur për të llogaritur sasinë totale të energjisë së përdorur nga një pajisje?
Formula që lidh energjinë dhe fuqinë është: Energjia = Fuqia x Koha. Njësia e energjisë është xhaul, njësia e fuqisë është vat, dhe njësia e kohës është e dyta