A ka metoda të tjera për të pastruar produktet PCR?
A ka metoda të tjera për të pastruar produktet PCR?

Video: A ka metoda të tjera për të pastruar produktet PCR?

Video: A ka metoda të tjera për të pastruar produktet PCR?
Video: ФИНАЛЬНЫЙ БОСС Часть 2 #6 Прохождение Bloodstained: Ritual of the Night 2024, Nëntor
Anonim

Për ato aplikacione që kërkojnë PCR pastrimi ose vërtetimi i PCR rezultatet, atje janë dy metodat ndiqen në përgjithësi: Produkt PCR izolimi duke përdorur një kolonë dhe xhel pastrimi nga një xhel agaroze.

Këtu, çfarë lloj kromatografie përdoret për të pastruar produktet PCR?

Për të pastruar produktet PCR, përdoret kromatografia me përjashtim të madhësisë. Kjo bllokon molekula të vogla si proteina, abetare , dhe nukleotidet ndërsa molekulat e mëdha si produktet PCR janë shumë të mëdha për të hyrë në rruaza dhe për të kaluar përmes kolonës në tubat e grumbullimit.

Gjithashtu, si e pastroni ADN-në? Në thelb, ju mundeni pastroj juaja ADN mostrat duke lizuar mostrat tuaja të qelizave dhe/ose të indeve duke përdorur procedurën më të përshtatshme (ndërprerje mekanike, trajtim kimik ose tretje enzimatike), duke izoluar acidet nukleike nga ndotësit e tij dhe duke e precipituar atë në një zgjidhje të përshtatshme tampon.

Për më tepër, pse e pastrojmë produktin PCR?

Pastrimi e ADN-së nga a PCR reaksioni është zakonisht i nevojshëm për përdorim në rrjedhën e poshtme dhe lehtëson heqjen e enzimave, nukleotideve, primerëve dhe përbërësve bufer. Metodat e përdorura zakonisht përdorin kolona rrotulluese që përmbajnë një matricë silicë me të cilën ADN-ja mund të lidhet në mënyrë selektive në prani të kripërave kaotropike.

Pse duhet pastruar ADN-ja?

ne pastër lart ADN nga solucionet ujore për të hequr kripërat buferike, enzimat ose substancat e tjera që mund të ndikojnë në aplikimet në rrjedhën e poshtme. Shembujt përfshijnë reagimin PCR pastër lart, pastër deri pas kufizimit tretet dhe pastër deri në gjenomike ose plazmide ADN të kontaminuara me proteina/mbeturina qelizore.

Recommended: